目前,新型冠状病毒肺炎疫情形势依然严峻,在《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》,新冠病毒对紫外线和热敏感,56℃30分钟、乙醚、75%乙醇、含氯消毒剂、过氧乙酸和氯仿等脂溶剂都可以有效灭活病毒。适于消毒的是75%的医用酒精,无论浓度过高或者过低都无法有效杀灭病毒。75%酒精主要作用是破坏蛋白质,使其丧失生物功能。冠状病毒是一种有包膜的病毒,75%的酒精可以在病毒的表面蛋白质包膜未变性前渗透入内部,使病毒所有蛋白都脱水变性凝固,达到彻底杀死病毒的效果。医疗上也常用体积分数为70%~75%的乙醇作消毒剂等,在国防化工、医疗卫生、食品工业、工农业生产中都有广泛的用途。
《乙醇消毒剂卫生标准》GB/T26373-2010规定了乙醇消毒剂的原料要求和技术要求、应用范围、使用方法、检验方法、标志和包装、运输和贮存、标签和说明书及注意事项。适用于以乙醇为主要原料制成的乙醇消毒剂,包括乙醇与表面活性剂、食用色素、护肤成分和食用香精等配伍的消毒剂。对于乙醇消毒剂有效成分含量测定,济南米莱仪器采用GC6900气相色谱仪测定消毒液中乙醇含量方法,提高测定方法的灵敏度和准确性。通过内标法和外标法,检测消毒液中乙醇含量,并经试验验证。
一、方法原理
乙醇消毒剂试样经水稀释后,经填充柱进样口进样,分离测定,以保留时间定性,外标法定量。
二、主要仪器及试剂
(1)GC6900气相色谱仪,配填充柱进样器,氢火焰检测器;
(2)GC6900配套自动进样器;
(3)填充柱:2m×4mm,60~80目,不锈钢材质;
(4)乙醇:色谱纯;
(5)超纯水;
(6)实验室常规玻璃器皿。
三、实验方法
1、仪器条件
进样口温度280℃,分流比70∶1;载气为氦气,流速1.0ml/min。
升温程序:50℃,保持5min;20℃,保持3.5min;120℃,保持2min;总运行10.5min。
FID检测器温度240℃,空气流速300ml/min,氢气流速30ml/min。
2(1)外标法
①标准系列配制:用甲醇配制成乙醇质量浓度分别为0、100、300、500、1000及2000mg/L的乙醇标准系列,进样1μl,测其峰面积,以乙醇峰面积对其含量绘制标准曲线。
②样品处理:取样品1ml,用甲醇定容至10ml容量瓶中,混匀,逐级稀释1000倍。10000rpm离心10min,通过自动进样器直接进样,进样量为1μl。每批样品取3个平行样,每样重复测定2次。
(2)内标法
①对照溶液配制:准确称取1.0~1.1g正丁醇(内标),1.5~1.7g乙醇,用纯水定容至10ml容量瓶中,稀释100倍,进样1μl。
②样品处理:分别准确称取0.1g氯化钠、1.0~1.2g正丁醇及2.0~2.2g样品(根据样品中乙醇含量高低确定样品量,尽可能使得试样与对照溶液中乙醇浓度相近),用纯水定容至10ml容量瓶中,混匀后,稀释100倍。10000rpm离心10min,进样1μl。
四、验证方法
(1)回收率:外标法,平行取3份已知乙醇含量的免洗消毒液样品约0.5g,分别加入0.05、0.25和0.45g无水乙醇,用纯水定容至10ml容量瓶中,混匀后,纯水稀释100倍。按照1.2.1的仪器条件进行检测。内标法,分别称取0.1g氯化钠、1.0g已知乙醇含量的消毒液样品及0.8g无水乙醇,用纯水定容至10ml容量瓶中,混匀后,纯水稀释100倍。
(2)重复性:取同一批次的消毒液,配制6份供试品溶液,进行乙醇含量测定,用相对标准偏差表示。
(3)线性与范围:外标法,取对照品储备液,稀释成不同浓度样品,采用拟定的色谱条件测定,以浓度(X)对峰面积(Y)进行线性回归,考察线性范围。内标法,采用单点校正。
(4)更低检测限:取无水乙醇的甲醇(水)溶液,逐级稀释,信噪比(S/N)3∶1时对应的乙醇浓度为更低检测限。
五、测试结果
试验结果显示,GC6900气相色谱仪用内标法检测消毒液中乙醇含量,具有实验条件影响小、准确度和精密度较高等优点。